新冠肺炎疫情當(dāng)前,P3實(shí)驗(yàn)室成為“手撕病毒”的秘密武器之一——每天,一份份新冠肺炎核酸檢測(cè)均在這里開展。病毒究竟在這里是怎樣被“揪出來”的?下面就讓經(jīng)濟(jì)日?qǐng)?bào)記者帶您揭開P3實(shí)驗(yàn)室的神秘面紗。
“這里是與病毒‘零距離’接觸的地方,整個(gè)實(shí)驗(yàn)室完全密封,室內(nèi)處于負(fù)壓狀態(tài),我們喜歡用‘三流’來形容它,即人流、物流、氣流的單向流動(dòng),確保在里面的污染物不會(huì)泄漏到外面而造成污染!睆V東省第二人民醫(yī)院P3實(shí)驗(yàn)室主任林劍國說。
廣東省第二人民醫(yī)院作為全國首家省級(jí)應(yīng)急醫(yī)院,擁有國家級(jí)應(yīng)急醫(yī)學(xué)救援隊(duì)、WHO國際應(yīng)急醫(yī)療隊(duì),有著與病毒戰(zhàn)斗的豐富經(jīng)驗(yàn)。而P3實(shí)驗(yàn)室,就是該院“手撕病毒”的秘密武器之一。
通過緩沖間進(jìn)入到實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。
揭秘一
前世今生
P3實(shí)驗(yàn)室全稱“生物安全防護(hù)三級(jí)實(shí)驗(yàn)室”,P是英文Protection的縮寫。
生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室根據(jù)微生物及毒素的危害程度不同分為四級(jí),一級(jí)最低,四級(jí)最高。其中,四級(jí)實(shí)驗(yàn)室全球僅有幾十家;三級(jí)適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素,其中包括新冠病毒核酸檢測(cè)。
揭秘二
抽絲剝繭
核酸檢測(cè)是確診新冠肺炎的“金標(biāo)準(zhǔn)”,而檢測(cè)流程中的每一個(gè)環(huán)節(jié)都是精細(xì)活,容不得半點(diǎn)馬虎。在操作中,實(shí)驗(yàn)員面對(duì)眼前的樣本,需要“一個(gè)一個(gè)地揭開蓋子,開蓋加樣和核酸提取”,這無疑是與病毒的正面交鋒。那么,P3實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)員是如何與病毒“過招”的?
據(jù)介紹,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的檢測(cè)流程可分為5個(gè)步驟:樣本進(jìn)入“傳遞窗”——滅活處理——開蓋加樣和核心提取——擴(kuò)增反應(yīng)判斷結(jié)果——高壓滅菌。
通過核酸擴(kuò)增儀進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。
第一步是樣本進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。采集的檢測(cè)樣本進(jìn)入P3實(shí)驗(yàn)室前,得先進(jìn)入一個(gè)特殊的窗口——“傳遞窗”,也叫做空氣鎖,保證傳遞樣本時(shí)帶進(jìn)去的空氣被隔離,不污染外部環(huán)境。樣本在這里開啟它在實(shí)驗(yàn)室中短暫的一生。
“傳遞窗”也叫做AirLork(空氣鎖)。
第二步是檢測(cè)前的滅活處理。樣本在水浴箱經(jīng)半小時(shí)56℃高溫滅活,這樣檢測(cè)樣本時(shí)就會(huì)相對(duì)安全,但病毒蛋白的基因序列并沒有受到影響。
第三步是檢測(cè)的核心環(huán)節(jié)——開蓋加樣和核酸提取。廣東省第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)部副主任技師胡亮杉介紹,操作時(shí),實(shí)驗(yàn)員要對(duì)每一份樣本打開瓶蓋,吸取轉(zhuǎn)移,且需兩個(gè)人高度配合才能完成——每一次都是實(shí)驗(yàn)員與病毒面對(duì)面的“開撕”。
“樣本在開蓋轉(zhuǎn)移過程中,病毒非常容易暴露在實(shí)驗(yàn)室空氣中,與我們幾乎是零距離接觸。”胡亮杉說,“開蓋加樣時(shí),拿著微量移液器的手往往因?yàn)榇髦p重手套,而顯得有些笨拙,再加上眼罩、面屏和生物安全柜玻璃窗的三重阻隔,所有動(dòng)作都顯得緩慢,經(jīng)常是顫抖著左手扶右手完成的!
人工核酸提取的步驟更為復(fù)雜!昂怂崽崛】梢允褂脙x器輔助,但由于比對(duì)需要,往往要加以人工操作,需要反復(fù)進(jìn)行離心、加試劑、洗滌等10多個(gè)步驟,完成一例人工核酸提取要50分鐘左右!焙辽颊f。
第四步是判斷結(jié)果。提取的核酸送到核酸檢測(cè)室內(nèi),加入到擴(kuò)增試劑中,通過儀器進(jìn)行RT—PCR反應(yīng),用時(shí)約110分鐘,就可分析判斷結(jié)果為陰性或陽性了。
根據(jù)曲線和參數(shù)分析判斷結(jié)果。
最后一步是污染物的高壓滅菌處理。實(shí)驗(yàn)過程產(chǎn)生的污物通過高壓滅菌后,按相關(guān)普通醫(yī)療垃圾處理。
產(chǎn)生的污物通過高壓滅菌后,按相關(guān)醫(yī)療垃圾處理。
揭秘三
安全保障
下面,再來看看工作人員是如何工作的。
首先在清潔區(qū)內(nèi)穿戴中級(jí)防護(hù)服——通過緩沖間進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室內(nèi)負(fù)壓工作間,在這里進(jìn)行標(biāo)本處理,核酸提取及檢測(cè)——完畢后進(jìn)行空間、表面消毒,按順序脫下防護(hù)服——通過淋浴間更衣后,回到清潔區(qū)。這些步驟一個(gè)都不能少!
標(biāo)本處理間,在這里進(jìn)行開蓋加樣和核酸提取。
核酸檢測(cè)的宗旨是高效、有序和安全。其中工作人員的安全是重中之重。為確保安全,廣東省第二人民醫(yī)院采取了多種措施。第一,人員篩選;第二,崗前安全培訓(xùn);第三,嚴(yán)格消毒滅菌制度;第四,建立感控督導(dǎo)員制度,及時(shí)發(fā)現(xiàn)相關(guān)問題,確保人員身心安全。
到目前為止,該院P3實(shí)驗(yàn)室未出現(xiàn)過生物安全問題。
揭秘四
棄偽存真
在P3實(shí)驗(yàn)室,任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題均可能導(dǎo)致“假陰性”或“假陽性”。為保障檢測(cè)質(zhì)量,檢測(cè)結(jié)果將經(jīng)歷重重比對(duì)與復(fù)核。其中,檢測(cè)質(zhì)量的保障措施在檢測(cè)前就開始了。樣本采集的醫(yī)務(wù)人員必須經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)和考核才能上崗,樣本的質(zhì)量與采集的技術(shù)密切相關(guān),每一幀動(dòng)作流程均必須按規(guī)定進(jìn)行,樣本采集完后的護(hù)送工作需按照嚴(yán)密程序,由專人專道配送到實(shí)驗(yàn)室。
在檢測(cè)過程中,實(shí)驗(yàn)員須謹(jǐn)慎對(duì)待每一次測(cè)試,不錯(cuò)過任何一個(gè)可疑樣本。針對(duì)可疑樣本,將選用不同的試劑復(fù)核確定,防止“假陰性”出現(xiàn);同時(shí),針對(duì)陽性樣本會(huì)進(jìn)行病毒基因測(cè)序比對(duì),以防止“假陽性”出現(xiàn)。
檢測(cè)后,實(shí)驗(yàn)室將定期隨機(jī)抽取檢測(cè)后的樣本送第三方實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),保障檢測(cè)的準(zhǔn)確性。
揭秘五
所向披靡
被稱為“偵察兵”的該院P3檢測(cè)團(tuán)隊(duì)目前有21人,實(shí)行一天三班制。檢測(cè)團(tuán)隊(duì)70%以上是碩士以上學(xué)歷,均經(jīng)過分子生物學(xué)的培訓(xùn),擁有PCR上崗證。
“與戰(zhàn)斗在病房里的醫(yī)護(hù)人員不同,他們藏在實(shí)驗(yàn)室里,每天與病毒近距離接觸,是別人看不見的‘最前線’!绷謩f。
廣東省第二人民醫(yī)院P3實(shí)驗(yàn)室主任林劍國博士。
為嚴(yán)格遵照“新型冠狀病毒肺炎診療方案”及生物安全要求,檢測(cè)人員需在P3實(shí)驗(yàn)室負(fù)壓密閉的空間里穿著三級(jí)防護(hù)裝備,5個(gè)小時(shí)不吃不喝,甚至穿戴成人紙尿褲以解決上廁所的需要,并隨時(shí)要克服因負(fù)壓差及嚴(yán)密裝備導(dǎo)致的頭暈、嘔吐等癥狀,以及克服心理上的恐懼。咽拭子樣本是從疑似患者鼻咽部采集,可能含有較多新冠病毒。檢測(cè)人員從采樣罐里拿出樣本時(shí),在密閉的環(huán)境中很容易借助空氣傳播,但他們依然無怨無悔地戰(zhàn)斗在前線,把好第一道關(guān)。(經(jīng)濟(jì)日?qǐng)?bào)-中國經(jīng)濟(jì)網(wǎng)記者 鄭楊)